Hippocampale Neuronen 3 Schlüsselanhänger

Verteilung von Hippocampalneuronen, die EGFP ausdrücken, vom Nr4a1/Nur77-Promoter (Tg(Nr4a1-EGFP)GY139Gsat, www.gensat.org) in Hippocampal CA1, das für den vesikulären Glutamat-Transporter (VGluT1, rot, Invitrogen polyklonal, 1: 1:1 000) und mit DAPI (blau) gefärbt, um Zellschichten anzuzeigen. Der EGFP Ausdruck wurde mit Hühneranti-GFP verstärkt (Abcam, 1:2000). VGluT1 kennzeichnet spannende Terminals Synapsing in der molekularen Schicht des Gyrus dentatus, der Terminals aus Moosfasern in CA3 und der dendritischen Felder der Pyramidenzellen in Stratum orien und stratum radiatum. Nr4a1-EGFP wird stark von den Pyramidenzellen CA1 und in geringerem Maße in Pyramidenzellen CA3 mit dünnen Zellen im Gyrus dentatus (siehe zugehörige Bilder) ausgedrückt. Sektion (40 um, sagittal) wurde mit Fluoromount G montiert und mit einem 5X, 0,15 NA Objektiv auf einem Zeiss Axiovert Mikroskop fotografiert. AF568 war bei 562/40 nm aufgeregt und bei 624/40 nm mit Halbfelfiltern und einem dichromen Single-Band (530-585 nm reflektiert, 601-800 nm übertragen) abgesaugt. AF488 war bei 482/35 nm aufgeregt und bei 536/40 nm mit Halbfelfiltern und einem dichromen Single-Band (446-499 nm reflektiert, 513-735 nm übertragen) abgesaugt. DAPI wurde bei 350/50 nm angeregt und bei 460/50 nm mit einem CLP400-Dichroikum (Chroma) abgesaugt. Single-Images wurden für jeden Kanal mit einem Zeiss Axiocam MR CCD aufgenommen und mit Axiovision pseudofarbig gefärbt. Auf dem dargestellten Bild wurde eine lineare Hintergrundsubtraktion verwendet. Siehe Davis und Puhl (2011), Pubmed ID 21305052, für ein detailliertes Färbeprotokoll und Bilder des EGFP-Ausdrucks im Striatum und Amygdala in diesem Stamm. Dieses Bild ist Teil einer Reihe, die den Ausdruck des EGFP durch den Nr4a1-Promoter im gesamten Gehirn charakterisiert.